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论关于重楼水提液对小鼠胃肠运动功能的影响

作者:2017-05-31 18:23阅读:文章来源:未知

        胃肠动力学异常性疾病发病率日益增高,而中药在调节和改善胃肠功能方面有着自身的优势。重楼为百 合 科 植 物 云 南 重 楼 ( Paris polyphylla var.yunnanensis) 的干燥根茎,又 名 七 叶 一 枝 花 ( Parispolyphylla var. chinensis),以蚤休之名始载于《神农本草经》。其主要有效成分为甾体皂苷,并含有氨基酸、甾酮、蜕皮激素、黄酮苷等化合物。重楼药用历史悠久,近年来药理研究表明,该属植物具有止血、抗肿瘤、抗菌、抗炎等多方面药理作用。临床上,应用重楼治疗的疾病越来越多,重楼是否影响胃肠功能,目前尚未见报道。本实验以小鼠为研究对象,初步探讨重楼水取液对小白鼠胃肠运动功能的影响。 1 材料与方法

  1. 1 试剂 重楼(广西壮族自治区百色市市售药材),经广西右江民族医学院民族医学教研室覃道光教授鉴定为重楼根茎;活性碳末(广东台山化工厂,批号:940402);羧甲基纤维素钠(天津市光复精细化工研究所,批号:20070708);硫酸阿托品注射液(河南润弘制药股份有限公司,批号:1104161);盐酸肾上腺素注射液(天津药业集团新郑股份有限公司,批号:100912);新斯的明注射液(郑州羚锐制药股份有限公司,批号:1005161)

  1. 2 动物 昆明种小鼠 150 只,体质量 22 28 g,雌雄不限,由本院实验动物中心提供,合格证号:SCXK()2003-0003

  1. 3 仪器 ARII40/C 电子天平(奥毫斯,上海公司生产)

  1. 4 重楼水提液的制备 称取重楼饮片 50 g,加入10 倍量水(500 mL)常温浸泡18 h,大火煮沸后慢火煎煮1 h,过滤留下滤液,取滤渣再加水500 mL 煮沸后慢火煎煮1 h,过滤弃滤渣,合并两次滤液用16 层纱布过滤,隔水蒸发浓缩,定容为 1 g·mL-1 ,冰箱冷藏,用时恢复至室温。

  1. 5 碳末悬液的制备 称取活性碳末 5 g、羧甲基纤维素钠 1 g 溶于 100 mL 双蒸水中,搅拌均匀配制成碳末悬液,冰箱冷藏,用时恢复至室温。

  1. 6 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 取30 只小鼠按体质量随机分 3 组,即重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 ),重楼水提液高剂量组(5. 0 g·kg-1 )和正常对照组,每组 10 只。灌胃给药前,小鼠禁食12 h,每组小鼠均按每千克体质量剂量灌胃给药,对照组给予等体积双蒸水。灌胃给药 30 min 后,再以5%碳末悬液 0. 25 mL·(10 g)-1灌胃给药。20 min后,将小鼠处死,打开腹腔,结扎胃贲门和幽门,取出胃,用滤纸吸干后称质量,然后沿胃大弯剪开胃体,洗去胃内容物,再用滤纸吸干,称胃净质量。计算胃内容物残留率(%) = [(胃全质量 - 胃净质量) /半固体米糊]×100%  。以胃内容物残留率为指标评价胃排空速度。同时取出小肠自然平铺于桌面上,将小肠摆成直线并测量,以幽门至回盲部的距离作为小肠总长度,以幽门至炭末推进前端的距离作为炭末推进距离。用下列公式计算炭末推进百分比:炭末推进比(%) = 炭末在小肠内推进距离/小肠总长度 ×100%。以炭末推进比为指标评价小肠推进速度。

  1. 7 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即正常对照组、单纯阿托品组(0. 5 mg·kg-1 )、阿托品 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、阿托品 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )。实验前小鼠禁食 12 h,重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项,正常对照组和阿托品组给予等体积双蒸水。灌胃给药的同时正常对照组肌内注射等体积双蒸水,其余各组小鼠均按 0. 5 mg·kg-1 肌内注射阿托品,注射给药30 min后,操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。

  1. 8 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即正常对照组、单纯肾上腺素组(0. 3 mg·kg-1 )、肾上腺素 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、肾上腺素 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )。实验前小鼠禁食 12 h,重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项,正常对照组和肾上腺素组给予等体积双蒸水。灌胃给药的同时正常对照组肌内注射等体积双蒸水,其余各组小鼠均按 0. 3 mg·kg-1 肌内注射肾上腺素,注射给药30 min后,操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。

  1. 9 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的影响 取小鼠 40 只,随机分成 4 组,即新斯的明组(0. 125 mg·kg-1 )、新斯的明 + 重楼水提液低剂量组(2. 5 g·kg-1 )、新斯的明 + 重楼水提液高剂量组(5 g·kg-1 )、和正常对照组,每组 10 只 。实验前小鼠禁食 12 h,重楼水提液高、低两个剂量组的给药剂量和方法同“1. 6”项,对照组给予等体积双蒸水。新斯的明组、新斯的明 + 重楼水提液低剂量组、新斯的明+ 重楼水提液高剂量组在灌胃给药的同时均按0. 125 mg·kg-1 肌内注射新斯的明,正常对照组肌内注射等体积双蒸水。注射给药 30 min 后,操作方法及计算方法按“1. 6”项进行。1.10 统计学方法 采用 SPSS 13. 0 版统计软件进行统计学分析,数据以均数 ± 标准差(x ± s)表示,采用单因素方差分析,P <0. 05 表示差异有统计学意义。

  2 结果

  2. 1 对正常小鼠胃排空和小肠推进运动的影响 结果表明,与正常对照组比较,重楼水提液高、低两个剂量组的胃内残留率和小肠推进率差异有统计学意义。

  2. 2 对阿托品所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 结果表明,与正常对照组比较,阿托品组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与阿托品组比较,重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重楼水提液高剂量组的胃内残留率均差异有统计学意义。

  2. 3 对肾上腺素所致小鼠胃排空和小肠推进抑制的影响 结果表明,与正常对照组比较,肾上腺素组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与肾上腺素组比较,重楼水提液低剂量组的小肠推进率和重楼水提液高剂量组的胃内残留率差异均有统计学意义。见表 32. 4 对新斯的明所致小鼠胃排空和小肠推进亢进的影响 结果表明,与正常对照组比较,新斯的明组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。与新斯的明组比较,重楼水提液高、低两个剂量组的胃内残留率和小肠推进率均差异有统计学意义。

  3 讨论

  3.1 胃肠运动的调节因素 胃肠运动主要由神经、体液因素进行调节。神经调节包括交感神经、副交感神经和存在肠壁内的肠神经系统 。交感神经神经末梢通过释放去甲肾上腺素,作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上腺素能受体,而抑制胃肠运动。副交感神经末梢通过释放乙酰胆碱,作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的 M 受体,而促进胃肠运动。胃肠道上主要存在胆碱能 M 受体、肾上腺素 α β 受体、组胺受体及多种胃肠激素受体。体液因素主要是胃肠激素的调节,胃肠激素种类较多,不同的胃肠激素,对胃肠活动产生不同的效应。

  3. 2 重楼水提液对正常小鼠胃肠运动功能的影响实验表明,重楼水提液低剂量组有促进小鼠小肠推进作用,重楼水提液高剂量组有抑制小鼠小肠推进作用,重楼水提液高、低两个剂量组均有抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示,在完整的神经体液因素调节下,不同剂量的重楼水提液对正常小鼠小肠推进功能表现不一;但均能抑制正常小鼠胃排空功能,这可能与肠道活动比胃活动更复杂性有关。

  3. 3 重楼水提液对胆碱能系统的影响 新斯的明为可逆性的抗胆碱酯酶药物 ,使胆碱能神经末梢释放的乙酰胆碱破坏减少,突触间隙中乙酰胆碱积聚,具有兴奋胆碱能 M 受体的作用。实验表明,重楼水提液高、低两个剂量组均有拮抗新斯的明,抑制小鼠胃排空和小肠推进的作用。此结果提示,重楼水提液对胃肠运动抑制作用可能与阻断 M 胆碱能受体有关。阿托品是临床上常用的一种 M 受体拮抗药,通过阻断 M 胆碱能受体,使副交感神经抑制,导致胃肠平滑肌松,小肠推进运动减慢,临床上常用于胃肠痉挛等疾病的治疗。实验表明,重楼水提液低剂量组有拮抗阿托品,促进小鼠小肠推进的作用,而重楼水提液高剂量组有协同阿托品,抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示,重楼水提液对胃肠运动功能的影响可能不是单纯与阻断M 胆碱能受体有关。

  3. 4 重楼水提液对肾上腺素能系统的影响 支配胃肠的交感神经属于肾上腺素能神经,其末梢通过释放去甲肾上腺素,作用于胃肠道平滑肌细胞膜上的肾上腺素能受体,而抑制胃肠运动。实验表明,重楼水提液低剂量组有拮抗肾上腺素,促进小鼠小肠推进的作用,而重楼水提液高剂量组有协同肾上腺素,抑制小鼠胃排空的作用。此结果提示,重楼水提液对胃肠运动功能的影响可能与肾上腺素能系统有关。综上所述,重楼水提液可抑制胃运动,具有解除胃痉挛的作用,对于小肠运动,则不同的剂量产生不同的效应。因此,笔者推测重楼水提液对胃肠运动功能的影响除了与 M 胆碱能受体、肾上腺素能系统有关外;也可能是由于中草药成分复杂,胃肠机能状态存在差异,对药物中不同成分具有不同的反应结果;其作用机制有待进一步深入研究。本实验对治疗胃痉挛、肠功能紊乱等疾病提供一定的药理理论基础。

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