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浅谈GC-MS检测人心血及肝脏中的巴比妥

作者:2017-06-03 18:11阅读:文章来源:未知
  巴比妥(Barbital),分子式C8H12N2O3,分子量为184.19,属于环丙二酰脲类药物,显酸性,是常见的催眠镇静药,有抑制中枢神经的作用。随着巴比妥在临床上的广泛使用,越来越多案(事)件是由此引起的,这就是建立可靠、快速、简单,满足对生物检材中的巴比妥进行检验的方法具有较好的现实意义。本文基于巴比妥的理化性质及参考文献的基础上,提出生物检材经过简单的萃取后,用GC-MS对样品进行检测的方法。
  1 材料与方法
  1.1 主要仪器和试剂
  GC/MS:Agilent7890A/5975C气相色谱-质谱联用仪;配有电子轰击离子源(EI)及Nest11.0化学图谱库、95%乙醇(分析纯)、乙酸乙酯(分析纯)、甲醇(色谱纯)。
  1.2 检材
  待测样品:邹某某心血,邹某某肝脏。
  1.3 实验方法
  1.3.1 GC/MS仪器条件
  离子源:EI源,离子化能量:70eV,离子源温度:230℃;四极杆温度:150℃;色谱柱:HP-5 ms 30 m×0.25 mm×0.25 μm。进样口温度:280℃;传输线温度:250℃;程序升温:初温80℃保持3 min,以30℃/min的速率升温到300℃,保持8 min;进样方式:分流进样,分流比:10:1;载气:氦气,纯度:>99.99%,流速:1.0 ml/min。
  1.3.2 样品前处理
  取邹某某心血5 mL,邹某某肝脏10g (剪碎),分别置于50 mL具塞塑料离心管中,均加入LpH=3~4的95%乙醇15 m浸泡30 min,然后置于3000 r/min离心机离心3 min,取出上清液分别放置于两个蒸发皿中,残渣仍然用pH=3~4的95%乙醇30 mL浸提二次,并把后二次的上清液合并于同一个蒸发皿中,90℃水浴锅上蒸发皿挥干,取下,冷却一直至室温。
  用=3~5的盐酸水溶液10 mLpH少量多次的洗涤蒸发皿上的挥干物,并转移至50 mL具塞塑料离心管,用乙酸乙酯25 mL萃取二次,二次萃取液都置于同一蒸发皿中,把蒸发皿放在90℃水浴锅上挥干,取下蒸发皿,冷却至室温。多次地洗涤蒸发皿中的萃取物质用少量1mL色谱纯甲醇,放进样瓶中,邹某某待测心血便可以得到,以及待测肝脏。
  1.3.3 分析检测
  邹某某的待测心血,邹某某的待测肝脏,空白对照样品(色谱纯甲醇)分别进样1μL,进行分离分析,用GC/MS在1.3.1条件下。
  2 结 果
  2.1 心血的检测结果
  经检验色谱纯甲醇空白对照样品TIC中6.433 min处未出峰,说明色谱纯甲醇可以作为空白试剂使用。邹某某待测心血的TIC图,TIC中6.433 min出现巴比妥的色谱峰,邹某某待测心血TIC图中巴比妥色谱峰所对应的MS图,MS图中显示巴比妥的特征离子碎片为:141及156,检测结果可得出,邹某某待测心血中检出巴比妥的结论。
  2.2 肝脏的检测结果
  图3为邹某某待测肝脏的TIC图,TIC图中6.481 min出现巴比妥的色谱峰,图4为邹某某待测肝脏TIC图中巴比妥色谱峰所对应的MS图,MS图中显示巴比妥的特征离子碎片为:141及156,检测结果可得出,邹某某待测肝脏中检出巴比妥的结论。
  阑尾粘液性囊腺瘤的发生原因主要为患者的阑尾被其腺上肿瘤所阻滞,导致患者阑尾内的粘液被积流在阑尾内,使得阑尾内的压力变高,导致患者的阑尾内部粘液穿过膜层,并且在患者的阑尾周围或者腹膜后形成肿块,即阑尾粘液性囊腺。
  一般情况下,粘液性囊腺瘤不会被吸纳提所浸湿,并且其可以穿过黏膜的表层,导致患者出现假性粘液性囊腺瘤。如果患者的阑尾粘液性囊腺瘤为恶性肿瘤,则可能出现破裂的情况,这样会对患者的生命安全造成威胁。阑尾粘液性囊腺瘤并没有比较明显的临床症状,部分患者的临床症状与急性阑尾炎相似。大多数患者对其阑尾粘液性囊腺瘤确诊是通过其他手术或者体检中所发现。阑尾粘液性囊腺瘤会导致患者的肠道出现阻塞、肠套叠、蒂扭转等情况,如果患者没有及时对自身疾病进行诊断,并接受有效的治疗,则可导致患者病情加重,甚至出现癌变的情况,这样就增加了患者治疗的难度,对患者的生命健康造成威胁。
  在手术前为阑尾粘液性囊腺瘤患者进行诊断,其误诊率比较的高,本文研究结果表明,通过超声在手术前为阑尾粘液性囊腺瘤患者诊断的确诊率仅46.67%,其主要被误诊为急性阑尾炎、下腹包块炎症、卵巢囊肿以及阑尾囊肿。导致阑尾粘液性囊腺瘤术前误诊率高的主要原因为此病的发病率较低,导致医疗人员对其主要特征了解不够深入。目前阑尾粘液性囊腺瘤患者的主要治疗方法为手术治疗,同时为患者实施手术治疗可作为对其诊断的重要依据。为患者实施手术治疗的方法要根据患者的具体的囊腺瘤的位置、大小、性质等,给予患者符合其具体病情的手术治疗方法。
  综上所述,给予阑尾粘液性囊腺瘤患者超声诊断,可确定患者囊腺瘤的具体位置、大小、周围器官情况以及粘连情况,为患者的手术治疗提供一定的依据。同时,医疗部门要将强对阑尾粘液性囊腺瘤的认识,增加术前对其的确诊率,并给予患者相应的治疗。
  3 讨 论
  TIC图均显示分离效果好,背景干扰小,虽然心血及肝脏中定性的保留时间存在一定的差异,但是误差<1%,定性的准确性是不影响的,巴比妥的特征离子碎片再MS图中显示,及巴比妥的分子结构,与Nest11.0化学图谱库中巴比妥的匹配度>95%,这些都充分证明了定性的可靠性及所建方法的可行性。
  经案情调查,邹某某(男,15岁),在校期间被人打殴损伤,诊断为颅骨骨折,颅内出血,2016年某日上午突然死亡;据了解邹某某在住院期间确实用过巴比妥药物,本文在邹某某的心血及肝脏中均检出巴比妥,与案情相符,这也说明方法真实、可靠,可用人心血及肝脏中巴比妥的检测。
  4 结 论
  本文根据巴比妥显酸性的性质,采用95%酸性乙醇沉淀蛋白后,在酸性条件下进行检材前处理,用GC-MS检测人心血及肝脏中的巴比妥;所建方法简便、快速、可靠,巴比妥用于定性的保留时间为6.530 min,特征离子碎片为:141及156。
 

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