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通便玉蓉丸对小鼠排便作用及机制的讨论

作者:2017-02-23 10:37阅读:文章来源:未知
  功能性便秘是一种常见病、多发病,随着现代人们的生活方式、饮食习惯的变化,以及社会和精神心理因素对疾病的影响,便秘人群发病率在呈日趋增加的态势。便秘可直接引起或加强肛门直肠疾患,并严重影响现代人的生活质量。课题组经过长期临床实践,在济川煎和硝菔通结汤的基础上,筛选出肉苁蓉、芒硝、当归、黄芩等中药,应用现代制剂工艺技术成功研发出通便玉蓉丸,用于治疗脾肾虚弱型便秘。在前期研究基础上,本实验通过观察通便玉蓉丸的通便效应及作用机制,为通便玉蓉丸的中药新药临床研究提供参考依据。
  材料
  1. 动物
  清洁级ICR小鼠,体质量18-22g,雌雄各半。由第四军医大学实验动物中心提供,合格证号SCXK-(军)第2007007号。均给予小鼠标准颗粒饲料(购自第四军医大学实验动物中心),自由饮水和自然昼夜节律光照,适应性饲养1周。
  2 . 仪器
  电子天平:赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;电子石英记时器:姜堰市新康医疗器械有限公司;型号:KK98-A。
  3. 药物
  通便玉蓉丸(提炼药粉含生药量1.997g/g),陕西中医学院药物研究所,批号100101;麻仁润肠丸:北京同仁堂股份有限公司,批号11020159;新斯的明:上海信谊金朱药业有限公司,批号31022770;复方地芬诺酯:常州康普药业生产,批号0906004。0.9%氯化钠溶液:四川科伦药业股份有限公司,批号:100121;10%的碳末混悬液,自备。
  4. 通便玉蓉丸制备工艺
  肉苁蓉、芒硝、当归、黄芩等加水煎煮2次,第1次加10倍量的水,第2次加8倍量的水煎煮2h,合并煎液,静置沉淀,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.20-1.25(70℃)的清膏,加入适量的蔗糖和糊精,制成丸粒。
  方法
  1. 通便玉蓉丸对正常小鼠排便的影响
  1.1 分组及给药 ICR小鼠90只, 按体质量随机分成6组,即正常组、通便玉蓉丸小、中、大剂量组(8.1、16.2、32.4g/kg)、麻仁润肠丸组(3.2g/kg)、新斯的明组(0.0075g/kg),每组15只。灌胃给药,每天1次,连续4d,正常组给予等量蒸馏水。
  1.2 对正常小鼠的排便影响
  小鼠禁食不禁水12h,次晨给药1次,正常组灌胃等量0.9%氯化钠溶液,给药后15min,灌胃碳末0.2mL,连续观察6h,观察内容:每只小鼠的第1粒排黑便时间;每只小鼠的排便粒数和排便重量;粪便称重后放入烘干箱内(80℃)连续烘干2h,取出后,称量其相应的干重并记录,计算粪便含水量。
  2. 通便玉蓉丸对便秘小鼠排便的影响
  2.1 分组及给药
  ICR小鼠84只, 雌雄各半,按体质量随机分成7组,即正常组、模型组,通便玉蓉丸小、中、大剂量组(8.1、16.2、32.4g/kg)、麻仁润肠丸组(3.2g/kg)、新斯的明组(0. 0075g/ kg),每组12只。灌胃给药,每天1次,连续4d,正常组给予等量蒸馏水。
  2.2 小鼠便秘模型的建立
  地芬诺酯小鼠便秘模型的复制方法:参考文献小鼠适应性饲养1周,禁食不禁水12h后,给予地芬诺酯混悬液10mg/kg灌胃。观察给药后6h内造模小鼠排出的稀粪点数、干粪点数以及不排便的小鼠数量。模型成功的标志:小鼠体质量减轻、皮毛蓬乱、倦怠嗜卧、无稀粪、干粪点数明显少于正常阴性对照组以及7%以上小鼠出现不排便,提示小鼠便秘模型复制成功。
  2.3 对便秘小鼠的排便的影响
  造模成功后,禁食不禁水12h,除空白组外各组先给予地芬诺酯灌胃,1h后各组给予相应受试药物,间隔20min,给予碳末灌胃。给药后,将各组小鼠分别单独置于代谢笼中,笼下垫滤纸,连续观察6h,灌胃结束时开始计时。记录各组小鼠首次排黑便时间、每小时排便粒数和粪便湿重重量,粪便称重后放于烘箱内(80℃),连续烘烤2h后取出,称量粪便干重并记录,计算粪便含水量。
  3. 统计学方法
  所有实验数据用x-±s表示,采用SPSS 18.0软件进行统计学分析,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
  结果
  1. 对正常小鼠排便的影响
  1.1 首次排黑便时间
  与正常组比较, 通便玉蓉丸大、中、小剂量组、麻仁润肠丸组及新斯的明组首次排黑便时间均缩短,且通便玉蓉丸大剂量组有显著差异(P<0.05)。
  1.2 通便玉蓉丸给药后6h内对正常小鼠排便干、湿重的影响
  与正常组进行比较,在给药后6h内,通便玉蓉丸大、中剂量组排便湿重、干重及小剂量组湿重均有明显增加(P<0.01);且通便玉蓉丸大、中剂量通便功能优于麻仁润肠丸。
  1.3 通便玉蓉丸对正常小鼠粪便含水量的影响
  与正常组比较,在给药后6h内,通便玉蓉丸大、小剂量组、新斯的明组粪便含水量均有显著增加(P<0.05,P<0.01)。说明通便玉蓉丸可有效提高小鼠粪便的含水量。
  2. 通便玉蓉丸对便秘小鼠排便的影响
  2.1 首次排黑便的时间
  与模型组比较,通便玉蓉丸大、中剂量组、麻仁润肠丸组、新斯的明组以及正常组首次排黑便时间均显著缩短(P<0.05,P<0.01)。
  2.2 通便玉蓉丸给药后6h内对便秘模型小鼠排便干、湿重的影响
  给药6h内,与模型组比较,正常组、通便玉蓉丸大、中、小剂量组、麻仁润肠丸组及新斯的明组均能显著增加便秘小鼠排便的干、湿重(P<0.01)。
  2.3 通便玉蓉丸对便秘小鼠粪便含水量的影响
  在给药后6h内,与模型组比较,通便玉蓉丸大、中剂量组、麻仁润肠丸组、新斯的明组粪便含水量均有显著增加(P<0.01)。说明通便玉蓉丸可有效提高小鼠粪便中的含水量。
  讨论
  现代医学对功能性便秘的病因及发病机制还不十分明确,目前对于便秘病理机制的认识都集中在肠神经系统及神经递质的异常方面,研究发现Fc患者胃肠动力学异常与血管活性肠肽、P物质、一氧化氮、5羟色胺等有关。也有从cajal起搏细胞角度进行研究。
  中医认为肾虚是功能性便秘的主要病因病机, 尤其是老年功能性便秘。肾主五液而司二便,肾虚精亏,肠道失润,传导不利,气机壅滞,致故大便秘结。同时,凡禀赋不足或年老衰微,肾气虚则不能温煦脾阳,脾阳不足,运化失职,大肠传导无力亦能引起便秘。通便玉蓉丸由肉苁蓉、芒硝、当归、黄芩等组成,具有“补肾养血,润肠通便”的功效,既能温补肾精,养血通便治本,又能软坚、清热治标,且该方中内不含蒽醌类药物(蒽醌类药物对于肠道黏膜有刺激作用,长期服用会造成肠道黏膜病理性转变),经前期临床及实验研究证实该方临床疗效显著且无毒副作用,因此该方可长期服用,且本方药味精简,为进一步的研究提供了广阔的空间。
  现代医学研究发现:与正常人群比较,便秘患者的粪便在肠道的通过时间延长,引起排便频率降低。通过观察便秘模型动物给药后的首次排便时间的变化情况,可以反映药物对便秘的治疗效果。便秘的产生除了肠道的动力异常外,还与肠内水分多少有关系,研究证实,药物刺激、饮水过少等因素均可使进入结肠的水分量过少而导致便秘。临床报道亦表明,部分结肠传输功能正常的便秘患者,其便秘产生的主要原因是肠道内水分不足。因此,调节肠壁对水分吸收的功能和增加肠道的水分含量,也是治疗便秘的重要方法。
  前期研究表明,通便玉蓉丸可促进便秘小鼠肠蠕动而达到治疗便秘的作用。本研究结果显示,通便玉蓉丸大、中、小剂量均能增加正常和便秘小鼠粪便的含水量,使小鼠肠道内水分含量增加,其机制可能是通便玉蓉丸能抑制肠壁对水分的吸收,从而达到软化大便,治疗功能性便秘发的目的。
 

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